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刺参腐皮综合征病原菌的分离鉴定及特性分析
为探究大连地区某刺参养殖场仿刺参溃烂死亡的病因,自患病仿刺参病灶处分离出1株优势菌株AP-1,经形态学观察、16S rDNA序列分析及生理生化鉴定,确定其为溶藻弧菌。人工回接感染试验采用腹腔注射感染、体壁创伤浸浴感染及浸浴感染3种攻毒方式,结果显示,仿刺参除浸浴感染未出现病变症状外,其他2种攻毒方式均呈现不同程度的剂量依赖性致死,且体壁创伤浸浴攻毒的半数致死密度为5.23×106 cfu/mL,腹腔注射攻毒的半数致死剂量为3.08×104 cfu/g。此外,对其毒力相关基因进行PCR检测,发现其携带有toxR、FlaA、Collagenase、fur、AspA、ompW和tlh 7种毒力相关基因。药敏结果表明:该菌对氨苄西林、哌拉西林、奥格门汀、头孢唑林、头孢噻肟及阿米卡星6种抗生素耐药;对头孢呋辛、头孢西丁、氯霉素、氨曲南和新霉素5种抗生素表现为中介;而对其他16种受试抗生素敏感。本试验结果可为大连地区仿刺参的健康养殖及病害防治提供科学依据和参考。
2023/10/10
泥鳅鳃出血病病原菌及其拮抗菌的分离鉴定
泥鳅鳃出血病是泥鳅养殖过程中的易发疾病,自病灶部位分离到优势病原菌JY5,随后自发病泥鳅养殖池底泥分离到可抑制病原菌JY5生长的拮抗菌CJT23。通过对菌株JY5和CJT23进行菌落形态观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,初步判定病原菌JY5为维氏气单胞菌,拮抗菌CJT23为边缘假单胞菌。对边缘假单胞菌CJT23进行药敏试验,结果表明,该菌对环丙沙星、诺氟沙星、庆大霉素、链霉素、恩诺沙星、复方新诺明6种药物表现出敏感及中敏,提示在使用边缘假单胞菌CJT23防治泥鳅鳃出血病时应避免使用上述6种敏感及中敏抗生素;拮抗谱试验结果表明,边缘假单胞菌CJT23对病原菌维氏气单胞菌JY5、副溶血弧菌、鳗弧菌、创伤弧菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和哈维氏弧菌表现出不同程度的抑菌性,其抑菌圈直径分别为(21.00±0.41)、(17.97±0.21)、(15.93±0.26)、(12.73±0.26)、(12.63±0.17)、(12.57±0.12) mm和(11.47±0.17) mm,而对豚鼠气单胞菌无抑菌效果。本试验结果可为泥鳅鳃出血病的生物防治提供基本材料依据,并为泥鳅的可持续性养殖和生态环境保护奠定基础。
中草药及复方对嗜水气单胞菌体外抑菌作用研究
为有效控制因嗜水气单胞菌感染斑点叉尾(鱼回)造成的经济损失,通过水煎法获得金银花、夏枯草、石榴皮等41味中草药的提取物,测定中草药及其复方对嗜水气单胞菌的体外抑杀效果,包括抑菌圈直径、最小抑菌质量浓度及最小杀菌质量浓度3项指标,综合筛选出体外抑菌效果较好的单方及复方中草药。试验结果表明,14种单方中草药具有抑菌圈,最小抑菌质量浓度最低为黄连的7.81 mg/mL,综合最小杀菌质量浓度结果,筛选出抑菌效果较好的6种单方中草药,即石榴皮、诃子、紫花地丁、苏木、黄连、乌梅;药物联用结果显示,6种单方之间未出现拮抗的比例为93.3%,联用效果较好的比例为80%;根据正交表设计的25组复方结果显示,V(石榴皮)∶V(诃子)∶V(紫花地丁)∶V(苏木)∶V(黄连)∶V(乌梅)=2∶5∶1∶2∶3∶4(M-10复方组)的综合抑菌效果最好。本结果可为中草药治疗嗜水气单胞菌细菌性疾病的应用提供理论基础。
铅、镉、铬和锌盐对单环刺螠急性毒性效应的研究
在水温(15±1)℃、盐度25下,将平均体质量为(21.2±4.2) g的单环刺螠置于50 cm×60 cm×60 cm塑料箱中,采用水生生物急性毒性试验方法,研究Pb(NO3)2(0、1.00、2.66、7.08、18.84、50.12 mg/L)、CdCl2(0、10.0、27.5、45.0、62.5、80.0 mg/L)、K2Cr2O7(0、20、65、110、165、200 mg/L)和ZnSO4(0、10、20、30、40、50、60、70 mg/L)4种重金属盐对单环刺螠在96 h内的急性毒性。试验结果显示:Pb(NO3)2对单环刺螠的48、72、96 h半致死质量浓度为23.396、7.505、2.177 mg/L,CdCl2为68.748、34.512、18.189 mg/L,K2Cr2O7为139.005、50.691、24.035 mg/L,ZnSO4为40.978、24.962、13.131 mg/L;Pb(NO3)2、CdCl2、K2Cr2O7、ZnSO4对单环刺螠的安全质量浓度分别为0.2177、1.8189、2.4962、1.3131 mg/L;其毒性依次为Pb(NO3)2>ZnSO4>CdCl2>K2Cr2O7。
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